服务简介 背景：IND申报项目需完成下游纯化工艺开发，进行质量属性合格蛋白制备。 方法：采用高效、实验设计（ DoE ）、客户导向合规填料、纯辅料进行纯化工艺开发。 1. Pool 和单抗筛选阶段细胞培养物料进行填料筛选。 2. 采用单克隆确认蛋白，进行纯化工艺优化和确认。 3. 基于QbD理念，纯化工艺开发优先应用DoE实验设计。 4. 所用物料，试剂辅料标准经过严格审核，确保合规后使用。 服务亮点 1. 高效率和高收率 设备齐全、动态调整人力资源、蛋白稳定性考察和纯化工艺开发协同推进。工艺总体开发周期小于2个月。 优化上样pH、电导、蛋白浓度，保留时间等参数提高载量，优化洗脱pH、电导、缓冲液种类等条件提高目标蛋白收率。 深层过滤、亲和层析、阳离子交换层析、阴离子交换层析、纳滤、超滤收率分别高于 95%、 95%、85%、 95%、98%、 95%；总体回收率高于60%。 2. 高质量 蛋白质量属性：SEC-HPLC纯度高于97%，非还原CE-SDS纯度高于95%，CEX主峰高于50%等各项检测均符合中国和美国药典要求。 HCP、HCD、rProteinA、内毒素、微生物负荷等杂质残留符合药典和放行要求。 翻译后修饰质量等属性符合药典标准要求。 3. 以服务客户为基本导向 所用填料和辅料保障合规前提下，优先选用客户指定或建议的来源。 可定制化为客户提供个性试验方案。 成熟模块化平台，先进的检测仪器设备，多个检测指标同步推进，助力项目早日申报。 案例展示 1. 某双抗项目亲和层析 背景：某治疗胰腺癌的双抗IND申报CMC生产工艺开发，本案例进行纯化工艺之亲和层析工艺开发。 目的：填料筛选和载量测试，杂质去除条件优化，提高收率。 方法：10%抗体titer流穿法测试饱和载量，80%饱和载量定义工作载量，中间洗优化去除HCP、HCD等杂质，洗脱缓和从业和pH条件摸索提高收率。 结果：载量达到48 mg/mL，收率95%以上；杂质残留合格，符合要求。 结论：亲和层析工艺开发成功，工艺性能和参数满足要求。 Fig. 1 某双抗项目亲和层析图谱 2. 某双抗项目阳离子交换层析 背景：某治疗胰腺癌的双抗IND申报CMC生产工艺开发，本案例进行纯化工艺之阳离子层析工艺开发。 目的：填料筛选和载量测试，杂质去除条件优化，提高收率。 方法：采用QbD的理念，全析因DoE，优化阳离子交换层析工艺参数，获得最高载量，最低HCP、HCD等杂质含量残留工艺操作范围，提高目标蛋白SEC、CE、CEX等质量属性。 结果：载量达到55 mg/mL，收率85%以上；杂质残留合格，符合要求。 结论：阳离子层析工艺开发成功，工艺性能和参数满足要求。 Fig. 2 某双抗项目阳离子交换层析图谱 3. 某双抗项目阴离子交换层析 背景：某治疗胰腺癌的双抗IND申报CMC生产工艺开发，本案例进行纯化工艺之阴离子层析工艺开发。 目的：填料筛选和HCP、HCD、rProteinA、内毒素等杂质去除条件优化。 方法：采用QbD的理念，流穿模式，全析因DoE，优化阴离子交换层析工艺参数，获得高载量，低HCP、HCD等杂质含量残留工艺操作范围。可有效去除相关病毒，保障终产品生物安全性。 结果：载量达到150 mg/mL，收率95%以上；杂质残留合格，符合要求。 结论：阴离子层析工艺开发成功，工艺性能和参数满足要求。 Fig. 3 某双抗项目阴离子交换层析图谱 4. 某双抗项目整体下游纯化工艺效果指标 背景：某治疗胰腺癌的双抗IND申报CMC生产工艺开发，总结全流程工艺性能。 目的：工艺参数总结，评估工艺性能。 方法：分步骤总结工艺性能和杂质残留情况。 结果：工艺性能参数满足生产要求，杂质残留满足法规要求。 结论：工艺开发成功，可用于IND申报蛋白样品生产。 Table 1 某双抗项目纯化工艺步骤指标 流程 载量/参数 收率 SEC NR-CE CEX HCP (ppm) HCDNA (Pg/Dose) rProteinA (ppm) 深层过滤 ≥ 150 L/m2 ≥ 95% / / / ≥ 50000 / / 亲和层析 ≤ 48 mg/ml ≥ 93% ≥ 95% ≥ 94% ≥ 60% ≤ 5000 ≤ 200 ≤ 100 低pH孵育 病毒灭活 pH 3.5~3.7 ≥ 95% ≥ 95% ≥ 94% ≥ 60% / / / 中间品 深层过滤 ≤ 1000 g/m2 ≥ 95% ≥ 95% ≥ 94% ≥ 60% 600~1000 ≤ 100 ≤ 80 阳离子 交换层析 ≤ 55 mg/ml ≥ 85% >98% ≥ 95% ≥ 65% 100-200 ≤ 50 ≤ 30 阴离子 交换层析 ≤ 150 mg/ml ≥ 95% >98% ≥ 95% ≥ 65% ≤ 20 ≤ 20 ≤ 10 纳滤 ≥ 1500 g/m2 ≥ 98% >98% ≥ 95% ≥ 65% ≤ 20 ≤ 20 ≤ 10 超滤 ≤ 1500 g/m2 ≥ 95% >98% ≥ 95% ≥ 65% ≤ 20 ≤ 20 ≤ 10