服务简介 抗体药研发和生产过程中的诸多环节都存在对蛋白原料的大量需求，如体内药效药代评估、制剂工艺开发及安全性评价和诊断原料的研发和生产。 三优生物推出高品质抗体大样快速制备服务，基于GMP生产细胞株，通过构建稳定细胞池进行抗体大样的制备，筛到的高表达稳定细胞池可用于后续大量蛋白的持续生产，全程仅需35天！ 服务内容 服务名称 客户提供 交付物及标准 周期 高品质抗体快速制备 （100 mg） 含目的基因的质粒 交付物： 1. 100 mg经纯化的抗体 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗体SDS-PAGE纯度＞95%，SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力（可选）：ELISA/FACS/Biacore，按项目 选择，在参比品亲和力的2倍范围内 4. 活性（可选）：在参比品活性的2倍范围内 4 周 高品质抗体快速制备 （500 mg） 含目的基因的质粒 交付物： 1. 500 mg经纯化的抗体 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗体SDS-PAGE纯度＞95%，SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力（可选）：ELISA/FACS/Biacore，按项目 选择，在参比品亲和力的2倍范围内 4. 活性（可选）：在参比品活性的2倍范围内 5 周 高品质抗体快速制备 （1000 mg） 含目的基因的质粒 交付物： 1. 1000 mg经纯化的抗体 2. 质检报告 交付标准： 1. 抗体SDS-PAGE纯度＞95%，SEC-HPLC纯度＞90% 2. 内毒素＜1 EU/mg 3. 亲和力（可选）：ELISA/FACS/Biacore，按项目 选择，在参比品亲和力的2倍范围内 4. 活性（可选）：在参比品活性的2倍范围内 5 周 服务亮点 1. 品质保证：多维质控，确保抗体品质 对抗体产物从纯度、活性、亲和动力学、热稳定性等多个维度进行质量控制，切实保证抗体品质。 2. 稳定量产：一次构建，持续生产 稳转获得的细胞池可持续用于后续抗体的稳定和大量生产。 3. 快速：获得克级抗体最快仅需约35天 从载体构建开始，到交付克级抗体，最快仅需35天。 案例展示 1. 表达量分析 对39个项目的细胞池摇瓶期表达量进行统计，结果如Fig. 1所示，平均表达量为2.2 g/L，多个细胞池表达量高于3.0 g/L。 Fig. 1 细胞池表达量分析 2. 细胞池Fed-batch培养 将抗体A分子进行快速细胞株构建，筛选得到的7个细胞池接种到培养基中进行摇瓶Fed-batch培养，定期取样，检测活细胞密度、细胞活率、表达量以及乳酸、葡萄糖等代谢数据，检测结果如Fig. 2所示。细胞株活细胞密度最高可到2.5×107 cells/mL，培养14天后，细胞活率仍可维持在70%以上，抗体表达量可达3.4 g/L，乳酸始终维持在相对较低水平。 Fig. 2 细胞池Fed-batch培养 3. 表达产物质控分析 3.1. SDS-PAGE (聚丙烯酰胺凝胶电泳) 抗体A分子表达产物纯化后经SDS-PAGE鉴定结果如Fig. 3所示，样品的非还原和还原分子量与理论分子量大小一致，纯度均大于95%，符合交付标准。 Fig. 3 SDS-PAGE 3.2. SEC-HPLC（分子排阻色谱法） 抗体A分子表达产物经过纯化后，进行SEC检测，结果如Fig. 4所示，样品无聚体，单体纯度达到100%，符合交付标准。 Fig. 4 SEC-HPLC 4. 表达产物活性分析 抗体A分子的快速细胞株表达产物活性分析结果如Fig. 5所示，其EC50值为0.012 μg/mL，表明其具有良好的生物活性。 Fig. 5 Binding determination by FACS