当地时间2024年1月25日，三优生物医药（上海）有限公司正式宣布，“SANYOTOO™兔单克隆抗体平台”震撼上线。

优兔兔单抗（SANYOTOO™）是基于三优生物自主研发的超万亿分子发现平台，发挥兔抗的天然优势，以“兔免疫库+噬菌体展示技术”为核心，倾心打造的集免疫、建库、筛选于一体的高效兔单抗筛选平台，“优兔”技术团队通过创新，集成了真核表达和自动化等技术，解决了大多数兔抗体不能在噬菌体展示系统中展示的问题，可满足制药/诊断/科研等多领域的抗体发现需求。

SANYOTOO™兔单克隆抗体开发技术原理及流程

三优生物特有的SANYOTOO™兔单克隆抗体开发可为客户从原材料准备开始，以兔免疫、噬菌体展示建库、库海选初筛复筛的形式为客户快速获得亲和力高且特异性强的抗体。该技术路线相比传统杂交瘤及单B细胞筛选技术，保留了更高的基因多样性，抗体亲和力高，后续改造更加简单高效，且获得兔单抗的时间周期及成本显著降低，是目前应用前景广泛，潜力巨大且高效的抗体筛选方法。适用于治疗、研究、诊断、检测等多种应用领域。

噬菌体展示技术路线筛选兔单抗显著的优势

▲ 噬菌体展示、杂交瘤、单B细胞筛选不同技术路线兔抗比较

五大亮点

1.  抗体序列明确，减少冗余筛选工作

采用基因工程和噬菌体展示技术，可直接获得抗体的基因序列，减少不必要的筛选工作。

2.  较杂交瘤节省3个月，可快速获得抗体

在建库和筛选环节仅需2个月，较杂交瘤技术的筛选环节，时间缩短了近3个月。

3.  交付数十至上百个先导抗体分子

采用阵列化多组建库方法以及多种类筛库策略，单一靶点可获得数十至上百个候选分子。

4.  抗体亲和力高，可结合更多精细表位

所获抗体亲和力更高，通常可达pM级别。

5.  真核表达，细胞水平验证，保证交付分子成药性

获得的分子会经过真核水平构建表达，对抗体的理化性质以及细胞功能做全面的检测，保证交付的先导抗体具有较好的成药性。

四大应用

1.  治疗领域

适用于肿瘤细胞治疗，细胞免疫治疗，基因治疗等靶点的抗体发现。

2.  研究领域

适用于小分子多肽,膜蛋白,跨膜蛋白等各种热门,筛选难度大的靶点发现。

3.  诊断领域

可与诊断公司合作,包括免疫诊断、核酸分子诊断、肿瘤标志物等相关诊断产品开发与发现。

4.  检测领域

可应用于酶联免疫、放射免疫、免疫组化、免疫沉淀、流式细胞术和生物传感器等。

案例-CDH17兔单抗筛选

▶ 1. 背景

CDH17 (Cadherin-17,CDH17)是一种与最常见胃肠道肿瘤(包括结肠直肠癌、胃癌和神经内分泌肿瘤)的不良预后和转移相关的癌症靶点，因CDH17 CAR-T相比其他靶向的同类疗法对同样表达CDH17的正常肠上皮细胞无毒性，仅仅杀伤癌细胞，因此是一个潜在的较为安全的实体瘤靶点。为了获取特异性靶向 CDH17 的特异性兔单克隆抗体，三优通过兔单克隆抗体平台，通过免疫兔子、构建噬菌体文库和通过 2-3 轮海选和真核细胞表达验证，在 15 周内快速筛选到多组能够特异性结合 CDH17 的候选抗体。

▶ 2. 血清效价检测

来自三优7天快速免疫的兔血清可获得较高效价。图中展示了采用三优筛选的佐剂进行7天快速免疫的血清效价测定结果。检测结果表明，通过7天快速免疫，兔血清效价可达到1:256000。

▶ 3. 候选分子验证

通过三优兔单克隆抗体平台筛选获得的候选分子大多具有较好的细胞水平结合活性。图中展示了采用FACS分析候选抗体与胃癌细胞SNU-5的亲和力测定结果。检测结果表明，来自兔免疫库的部分候选抗体的亲和力水平与对照抗体相当。

扩展技术解读-三优如何攻克兔单抗噬菌体展示难关

由于在大肠杆菌中人Fab抗体恒定区的表达水平高于兔Fab抗体的恒定区，由分别与人恒定结构域CL和CH1重组融合的兔可变结构域VL和VH组成的嵌合兔/人Fab被证明特别成功地用于通过噬菌体展示选择兔单克隆抗体（mAb）。大多数兔抗体的轻链都有一个额外的二硫键，连接可变区和恒定区，当可变区和恒定区之间的二硫键断裂，导致未配对的半胱氨酸残基产生。在嵌合兔/人Fab文库中含有兔轻链可变区和人轻链恒定区，未配对半胱氨酸残基的存在可能导致可溶性抗体表达减少，并降低噬菌体展示的效率。“优兔”技术团队通过创新，克服了未配对半胱氨酸残基的问题，从而解决了大多数兔抗体不能在噬菌体展示系统中展示的问题。

参考文献

(1) Rader C. (2009) Generation and selection of rabbit antibody libraries by phage display. Methods Mol Biol 2009; 525: 1 0 1–128.

(2) Ridder R, Schmitz R, et al. (1995). Generation of rabbit monoclonal antibody fragments from a combinatorial phage display library and their production in the yeast Pichia pastoris. Biotechnology (N Y) 1995;13:255–60.